蜂蜜是蜜蜂從開(kāi)花植物的花中采得的花蜜在蜂巢中釀制的蜜。蜜蜂從植物的花中采取含水量約為75%的花蜜或分泌物，存入自己第二個(gè)胃中，在體內(nèi)多種轉(zhuǎn)化的作用下，經(jīng)過(guò)15天左右反復(fù)醞釀各種維生素、礦物質(zhì)和氨基酸豐富到一定的數(shù)值時(shí)，同時(shí)把花蜜中的多糖轉(zhuǎn)變成人體可直接吸收的單糖葡萄糖、果糖，水分含量少于23%存貯到巢洞中，用蜂蠟密封。蜂蜜是糖的過(guò)飽和溶液，低溫時(shí)會(huì)產(chǎn)生結(jié)晶，生成結(jié)晶的是葡萄糖，不產(chǎn)生結(jié)晶的部分主要是果糖。
5-HMF由葡萄糖或果糖脫水生成，分子中含有一個(gè)呋喃環(huán)，一個(gè)醛基和一個(gè)羥甲基，其化學(xué)性質(zhì)比較活潑，可以通過(guò)氧化、氫化和縮合等反應(yīng)制備多種衍生物，是重要的精細(xì)化工原料。
《中國(guó)藥典》中采用液相色譜法分析檢測(cè)蜂蜜中的5-HMF，作為測(cè)定蜂蜜含量的質(zhì)量評(píng)價(jià)依據(jù)，實(shí)驗(yàn)以乙腈-0.1%甲酸為流動(dòng)相，用鳥(niǎo)苷作為定位物質(zhì)。
液相色譜系統(tǒng)（濟(jì)南上地電子科技有限公司）由高壓恒流泵與UV紫外檢測(cè)器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。使用專(zhuān)業(yè)工作站可以同時(shí)控制高壓恒流泵、紫外檢測(cè)器及恒溫柱箱等，具備多元高壓洗脫、波長(zhǎng)掃描等功能。廣泛應(yīng)用于研究開(kāi)發(fā)、醫(yī)藥檢驗(yàn)、食品檢測(cè)、化工分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)等眾多分析領(lǐng)域。
樣品準(zhǔn)備：取樣品1 g，置于燒杯中，精密稱(chēng)定，加10%甲醇適量溶解，并分次轉(zhuǎn)移至50 mL量瓶中，精密加入鳥(niǎo)苷對(duì)照品溶液1 mL，加10%甲醇至刻度，搖勻即得。
實(shí)驗(yàn)步驟：精密吸取待測(cè)液10 μL進(jìn)樣，領(lǐng)取鳥(niǎo)苷對(duì)照品溶液，5-HMF對(duì)照品溶液各10 μL進(jìn)樣，用以確定樣品色譜圖中5-HMF及鳥(niǎo)苷的色譜峰，進(jìn)行計(jì)算。
色譜條件：
色譜柱 | InertSustain AQ-C18（4.6×250mm，5μm） |
流動(dòng)相 | 乙腈-0.1%甲酸（V/V，5:95） |
柱溫 | 35℃ |
檢測(cè)波長(zhǎng) | 284 nm，254 nm |
流速 | 1.0 ml/min |
進(jìn)樣量 | 10 μL |
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